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晶抗为您创造的血清学之分离介绍
发布时间:2019-08-02   点击次数:60次

今天上海晶抗要为您介绍的是血清分离方法。

·血清的分离

  1.只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。

  2.操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。

  3.规范的实验操作技术可以避免或尽量减少喷溅和气溶胶的产生。血液和血清应当小心吸取,而不能倾倒。严禁用口吸液。

  4.移液管使用后应完全浸入适当的消毒液中。移液管应在消毒液中浸泡适当的时间,然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。

  5.带有血凝块等的废弃标本管,在加盖后应当放在适当的防漏容器内高压灭菌和/或焚烧。

  6.应备有适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出标本
                     
    在细菌的血清鉴定中,zui常使用的方法是凝集反应,其基本原理是细菌为颗粒性抗原,当与相应的抗体混合时,在一定浓度的电解质条件下,可出现肉眼可见的凝集现象。
 
    玻片法凝集实验是用诊断血清在玻片上与待测细菌相混合,在电解质存在下,若出现肉眼可见的凝集小块即为阳性,表示该菌为所用抗体的相应细菌。此法是一种定性实验,方法简便快速,特异性强。可用于鉴定菌种及菌型。用于鉴定细菌的诊断血清有以下几种: 

    1.多价诊断血清:即混合诊断血清。该血清含有两种(或型)以上细菌的相应抗体。一般用于细菌定群或初步分型。
 
    2.单价诊断血清仅含一种(或型)细菌的相应抗体。可用于细菌的定种(或型)。
 
    3.因子诊断血清细菌含有多种抗原成分,而且不同菌群细菌之间可有共同的抗原成分。因此,通过凝集吸收实验,将抗血清中的共同抗体除掉,仅含一种特异性抗体的诊断血清称为因子血清。可用于细菌分型。 

[所需材料]  
    1.菌种猪霍乱沙门菌。 

    2.诊断血清沙门菌A-E多价血清,定群的6个O群因子血清,定型的H因子血清。 

    3.其他:0.9%氯化钠溶液、载玻片等。 

[操作方法]
    1.取一洁净载玻片,用记号笔划两个1—1.5cm的圆圈。 

    2.取1:5或1:10诊断血清一接种环置于玻片左侧圈内,在右侧圈内放一接种环0.9%氯化钠作为对照。如天气炎热,环境温度高,则应适当多取血清及0.9%氯化钠,以防试剂短时间内干涸,影响结果的观察。 

    3.用接种环取待鉴定的新鲜细菌少许,分别研磨乳化于诊断血清及0.9%氯化钠内使之均匀混合。旋转摇动玻片数次,1—3分钟后观察结果。 

    按上述操作方法,依次分别做A-E多价血清定属,特异性O因子血清定群,H因子血清定型(或种)。 

[结果] 

 阴性:对照侧及实验侧均匀混浊不出现凝集。 

 阳性:盐水对照侧呈现均匀混浊,实验侧明显凝集。 

 自凝:对照侧及实验侧均出现凝集。 

    标本的检测,常常还需要加作一个阳性对照。观察结果时,先观察阴性对照及阳性对照,两个对照结果均符合实验设计时,再观察实验孔。
   
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